Si le personnage a un demi-cœur rouge ou aucun cœur rouge après avoir subi des dégâts, cela déclenche l'effet Necronomicon, qui inflige des dégâts à tous les ennemis présents dans la salle.
Permet d'entrer dans la Chambre Noire après avoir vaincu Satan dans Sheol en touchant le coffre.
Contrairement à l'entrée de la Chambre Noire, le Négatif est consumé par la porte et disparaît de l'inventaire d'Isaac.
Notes
Maman garantit de faire apparaître cet objet, si débloqué. Il apparaîtra en même temps que Le Positif, à condition que les deux soient débloqués. Cependant, ils sont mutuellement exclusifs : dès que l'un d'eux est ramassé, l'autre disparaît.
En utilisant soit un objet de téléportation et une Salle de Dé à 5 points, un Pilule Tranquillisante, un Diplopie, un Pièce Tordue, soit Touche R, il est possible d'obtenir à la fois le Positif et le Négatif, ou plusieurs copies du Positif ou du Négatif.
Avec Jacob et Esau, un alignement correct des deux personnages permet de récupérer à la fois le Positif et le Négatif.
Avec un timing parfait et une bombe, il est possible de récupérer à la fois le Positif et le Négatif.
Le Négatif permet d'accéder à la chambre noire, qui est également le nom d'une salle utilisée pour développer des photos (chambre noire).
Un négatif est un morceau de film sur lequel une image a été imprimée et développé, et qui peut être éclairé pour imprimer une image positive sur du papier photographique. Un négatif a des teintes et une luminosité inversées.
Necronomicon, qui inflige des dégâts à tous les ennemis présents dans la salle.
Chambre Noire après avoir vaincu 
Satan dans 
Sheol en touchant le coffre.
Dégâts +1.
A Strange Door dans 
Profondeurs II et ses variantes qui mènent à 
Mausolée/
Géhenne II.
Maman garantit de faire apparaître cet objet, si débloqué. Il apparaîtra en même temps que 
Le Positif, à condition que les deux soient débloqués. Cependant, ils sont mutuellement exclusifs : dès que l'un d'eux est ramassé, l'autre disparaît.
Salle de Dé à 5 points, un 
Pilule Tranquillisante, un 
Diplopie, un 
Pièce Tordue, soit 
Touche R, il est possible d'obtenir à la fois le Positif et le Négatif, ou plusieurs copies du Positif ou du Négatif.
Jacob et Esau, un alignement correct des deux personnages permet de récupérer à la fois le Positif et le Négatif.
??? et 
??? Impur, 
Judas des Ombres et 
Judas Impur, 
L'Âme, 
Le Délaissé Impur, 
Béthanie Impure ou tout autre personnage ayant choisi d'échanger ses réceptacles de cœur dans un pacte avec le Diable, 
Marchés Noirs, 
Patte de Guppy ou 
Épluche-Légumes.
Fléau de Cécité est actif.
Il est possible d'obtenir deux Négatifs en en obtenant un comme objet de départ avec 
Éden.
Premier Fragment de Clé et 
Second Fragment de Clé, 
1er Morceau de Couteau et 
2ème Morceau de Couteau, 
Lettre de Papa et 
Dogma), cet objet ne peut pas être rejoué. Il ne bénéficie toutefois pas de l'immunité dont bénéficie 
Néant.
Page Déchirée / 
Page Déchirée 2 : Inflige +40 dégâts supplémentaires. Les effets se cumulent entre eux et avec plusieurs exemplaires.
